Oriscience One-Step Express Cloning Kit（一步快速克隆试剂盒）基于同源重组原理，只需对含有15 bp左右同源碱基的插入片段与载体混合物进行一步处理（37℃，5 min），即可转化进入E. coli感受态细胞实现高效分子克隆。本产品相较于传统酶切-连接分子克隆技术路线，具有高效（阳性克隆率95%以上），快速（仅需5 min），操作简便（只需一步操作），适用范围广（可用于~20 bp-10 kb片段克隆）等多方面优势。

储存条件

-20℃保存。

技术路线

数据展示

注意事项

1. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。

Q1：转化培养后菌落数偏少

a. 载体、插入片段使用量不足或比例不佳:请按照说明书中推荐的量和比例配制反应体系。

b. 载体和插入片段不纯，抑制反应: 建议对载体、插入片段进行纯化.

c. 感受态细胞转化效率低: 建议使用转化效率高的商业化感受态细胞。如感受态细胞为自制，则需进行转化效率检测，确保感受态细胞的状态。

Q2：假阳性菌落占比高

a. 载体酶切线性化不完全，出现载体自连: 尽量避免单酶切，优化酶切体系，提高限制性内切酶使用量、延长酶切反应时间、胶回收纯化酶切产物。

b. PCR产物含有非特异性扩增产物: 优化PCR体系，提高特异性; 对PCR产物进行胶回收。