Oriscience Fast Endo-Free Plasmid Mini Extraction Kit 是一种用于小量 (1-5ml) 无内毒素质粒快速抽提的离心柱式试剂盒。采用先进的内毒素吸附缓冲液 (Binding Solution)，能有效去除质粒中的内毒素污染，纯化的质粒中内毒素含量远小于 0.1EU/μg，可大大提高转染实验效率和动物注射效果。本试剂盒无需使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，无需乙醇沉淀，操作时间短，可在 30-60min 之内完成。 提取提取的质粒内毒素含量极低且纯净度高，可直接用于转染、酶切、PCR、转化、测序等各种实验。

储存条件

RNase，-20℃保存；

其他组分，室温（15-25℃）保存。

数据展示

                             A.通过重组 C 因子内毒素检测试剂盒获取标曲，根据标准曲线计算出本产品所提取的质粒内毒素含量低于0.1EU/µg。

B. 使用本产品提取的pcDNA3.1-EGFP 质粒转染至293T细胞， 转染48 h后 EGFP 荧光效果。

注意事项

1. 首次使用前请短暂离心RNase A，按试剂瓶标签提示将RNase加入Solution I 中，于2-8℃保存。

2. 首次使用Wash Buffer II前按试剂瓶标签提示加入异丙醇，于室温保存。

3. 首次使用Wash Buffer III前按试剂瓶标签提示加入无水乙醇，于室温保存。

4. 温度较低时，Solution II 可能会有沉淀产生，如有沉淀，37℃水浴加热溶解混匀后使用。

5. 本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床诊断或治疗，食品及化妆品等用途。

Q1. 低产量或无 DNA

a. 培养的细菌没有转化相应的质粒 DNA 或细菌培养条件不正确。挑选确定含有转化质粒 DNA 的细菌进行培养，并确认细菌培养条件。

b. 细菌保存时间过长。细菌在甘油冻存液中保存时间较长，常会出现质粒丢失的现象，可以重新划平板，挑取含质粒的单菌落或重新转化。

c. Solution II  出现沉淀。置于 37℃溶解，混匀后再使用。

d. Wash Buffer II或Wash Buffer III没有添加异丙醇或无水乙醇。确认是否添加正确体积的异丙醇或无水乙醇。

Q2. 质粒 DNA 污染

a. 加入Solution II 后剧烈震荡导致基因组DNA降解。加入Solution II 后轻柔混匀，不可剧烈震荡或使用涡旋仪。

b. 裂解时间过长。Solution II 加入后立即混匀，裂解时间不要超过5 min。